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醫(yī)用生物安全柜使用規(guī)程及分類
醫(yī)用生物安全柜使用規(guī)程及分類
醫(yī)療生物安全柜的分類
根據(jù)主要幾項生物安全柜國際標準的規(guī)定,安全柜可分為一級、二級和三級三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。安全柜的分類級別與生物安全等級無關(guān)。
一級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機,依賴外接通風管中的風機帶動氣流,由于不能保護柜內(nèi)產(chǎn)品,目前已較少使用。
二級生物安全柜是目前應(yīng)用為廣泛的柜型。按照NSF49的中的規(guī)定,二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別:A1型,A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。
三級生物安全柜是為3-4級實驗室生物安全等級而設(shè)計的,柜體完全氣密,工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱(Glove box),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生物試驗。
生物安全柜使用規(guī)程
1.要根據(jù)標準和有關(guān)的規(guī)定,向所有可能使用生物安全柜的用戶解釋安全柜的使用及限制條件。應(yīng)發(fā)給工作人員書面規(guī)定或安全手冊或操作手冊。特別是必須明確告訴工作人員,在出現(xiàn)濺灑、破碎、方法不當?shù)那闆r下,安全柜無法保護操作人員。
2.安全柜只有在工作正常時才能使用。
3.安全柜前臉的玻璃觀察窗不得在安全柜處使用狀態(tài)時打開。
4.柜內(nèi)放置的儀器和材料必須保持在低數(shù)量。靜壓箱后部的空氣循環(huán)不得受阻。將材料放入安全柜的工作區(qū)之前,應(yīng)對其表面進行去污處理。
5.柜內(nèi)不得使用本生燈(一種煤氣燈),因其產(chǎn)生的熱會干擾氣流并可能損壞過濾器??梢允褂梦⑿碗姺贌隣t,但使用一次性滅菌環(huán)則更好。
6.柜內(nèi)所有的工作要在工作面的中部或后部進行,并能從觀察面板中看到。
7.操作手后方的活動要達到少。
8.操作手不應(yīng)將手臂來回伸進出柜子,以免干擾氣流。
9.前送風格柵不得被便簽、滴管、或其他材料堵住,否則會干擾氣流從而可能使材料受到污染,使人員處在暴露狀態(tài)。
10.應(yīng)在每次工作完成后及一天結(jié)束時,使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面。
11.柜子的風扇在工作開始前和工作完成后要再各運行5分鐘。
生物安全柜安放位置
從生物安全柜前臉的開口流入柜內(nèi)的氣流速度約為0.45米/秒。以這一風速,柜內(nèi)單向流的一致性易受干擾,很容易被安全柜附近人員的走動、開窗、送風配風器、門的開關(guān)所干擾。按理想的布置,應(yīng)放在遠離活動及可能有干擾氣流的地方。應(yīng)盡量在安全柜的后側(cè)及兩側(cè)留下30厘米的空間,便于維護作業(yè)。柜子上方則留下30~35厘米的高度,以便對排風過濾器的風速進行精確測量,并為排風過濾器的更換留下足夠空間。
生物安全柜的清潔與消毒
生物安全柜內(nèi)的所有物品,包括設(shè)備,都應(yīng)在工作完成之后進行表面去污處理并從柜內(nèi)取出,因為殘留的培養(yǎng)介質(zhì)可能會提供微生物的生長條件。安全柜的內(nèi)表面應(yīng)在每次使用前與使用后進行去污處理。要用消毒劑擦拭工作臺表面及內(nèi)壁面,使用的消毒劑應(yīng)能殺死柜內(nèi)可能存在的所有微生物。一天工作結(jié)束時,應(yīng)進行后表面去污處理,即對工作臺、各個側(cè)面、背面及玻璃的里面進行全面擦拭??梢允褂闷追垡夯?0%酒精,這種對目標生物有效的消毒劑。如使用漂白粉液這種有腐蝕性的消毒劑,則要用滅菌水進行二次擦拭。建議工作柜在清潔、消毒時處在工作狀態(tài)。如果其未處在工作狀態(tài),則應(yīng)運行5分鐘,以便在安全柜關(guān)閉前將其中的氣體清除掉。
生物安全柜的去污處理
對1級和2級生物安全柜的去污,是將適量的低聚甲醛(使柜內(nèi)空氣中的低聚甲醛的終濃度為80%)置于電熱盤或煎鍋上(從柜外控制)。另將一個放有比低聚甲醛多10%的碳酸氫的電熱盤或煎鍋也放在柜內(nèi)(在柜外控制)。這第二個容器上應(yīng)帶蓋,這個蓋子可以從遠處取下來(例如系在一根線上,線可以從柜外拉動)。這樣可以使提前中和的低聚甲醛達到小。如果相對溫度低于70%,有熱水的開口容器。如果沒有前隔板,則要用生型塑料擋板,將其用膠帶粘在前臉,確保不會有氣體漏入房間。當盤內(nèi)的低聚甲醛已全部揮發(fā)或開關(guān)已打開1小時后,將開關(guān)關(guān)閉。將安全柜放置一整晚不得觸動。然后將第二個盤子的蓋移開并打開其開關(guān),碳酸氫氨開始揮發(fā)。這時,關(guān)閉盤子的開關(guān),讓安全柜開始工作,使碳酸氫氨氣循環(huán)1小時。然后可以取下前隔板(或塑料擋板),安全柜即可使用。
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